利用his-tag纯化和复性基因工程产物肠激酶
对肠激酶的重组产物进行了诱导表达，分离纯化以及复性研究。结果表明，该工程菌用LB 培养基在37℃扩增至OD6000.5~0.6 时，加入0.4mmol/L IPTG，26℃诱导培养4 小时，此时目的蛋白的表达量可达菌体总蛋白的40％以上，但重组产物大多以包涵体形式存在于菌体中。工程菌经过超声破碎，高速离心，取沉淀，得到EKLC 包涵体的粗制品，通过包涵体洗涤液洗涤1h，得到较为纯净的包涵体。用蛋白变性液溶解变性1.5h后，经过一步法金属层析纯化复性，得到电泳纯度为96％的目的蛋白，复性产物最高活性为712U。
牛肠激酶 重组表达 his-tag 纯化工艺
顾玮彦 黄磊 徐志南 岑沛霖
浙江大学生物工程研究所 杭州 310027
国内会议
北京
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2005-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）