克雷伯杆菌中甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶的分离纯化、酶学性质研究

摘要：

在有氧条件下，利用DEAE Sepharose Fast Flow 弱阴离子离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B 亲和层析同时分离提纯克雷伯杆菌胞内甘油脱氢酶（GDH）和1,3-丙二醇氧化还原酶（PDOR）。与文献报道的严格厌氧条件或经多步纯化只得到一种关键酶相比，更便于实际操作。分别考察两种酶的最适表观反应温度和最适反应pH，酶的热稳定性和pH 稳定性。测定GDH 以甘油和NAD+为底物、PDOR 以1,3-丙二醇和NAD+为底物的米氏常数。考察两种酶的底物专一性，金属离子的影响。最后通过产物抑制作用，确定了GDH、PDOR 酶促反应为有序BiBi 机制，建立了动力学模型，确定了动力学参数。

关键词： 克雷伯杆菌 甘油脱氢酶 1,3-丙二醇氧化还原酶 分离纯化 酶学性质

作者: 陈宏文 方柏山 胡宗定

作者单位: 天津大学化工学院生化工程系 天津 300072;华侨大学工业生物技术研究所 福建 泉州 362011 华侨大学工业生物技术研究所 福建 泉州 362011 天津大学化工学院生化工程系 天津 300072

会议类型: 国内会议

会议名称: 第二届全国化学工程与生物化工年会

会议地点: 北京

会议语种:中文

在线出版日期: 2005-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）