禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达
本研究采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒ARV S1133株与广西分离株R2 σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒,经PCR、酶切鉴定以及测序后进行序列分析,σNS基因插入的位置,大小和阅码框架均正确,将阳性克隆命名为PGEX-S1133-σNS和PGEX-R2-σNS.构建好的重组质粒,37℃1 mmol/LIPTG诱导,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀.结果显示,目的蛋白以包涵体方式表达,蛋白分子量约为66.2ku,约占菌体总量的31.5％-34.8％.Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性.
禽呼肠孤病毒 σNS基因 基因表达 基因克隆
谢丽基 谢芝勋
广西兽医研究所,南宁,530001
国内会议
长沙
中文
561-564
2006-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）