禽传染性支气管炎病毒S1基因在毕赤酵母中的分泌表达
本研究根据GenBank已公布的IBV株S1基因全序列设计一对引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1566bp,5”端不含信号肽序列,3”端添加了终止密码子的IBV S1基因表达片段,克隆到毕赤巴斯德表达载体pPICgK,并电击转化毕赤巴斯德酵母GS115,筛选获得整合型阳性重组菌株GS115/pPIC9K-S1 His+Muts,重组菌株在1％的甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析,结果表明,IBV S1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76KD,能与IBV阳性血清特异性结合.通过摇瓶培养初步优化了接种量、诱导剂甲醇浓度以及诱导时间等对IBVS1蛋白表达有影响的条件,结果表明,在2％接种量、1％甲醇诱导第3天时重组菌株表达量达到最高水平,表达蛋白占上清中总蛋白量的12.5％.表达的IBV S1蛋白可作为制备IB诊断抗原、基因工程疫苗的基础材料,对IB的诊断防治有重要的学术价值和应用价值.
禽传染性支气管炎病毒 S1基因 毕赤酵母 分泌表达
余祖华 王红宁 周生 黄勇 柳萍
四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014;河南科技大学动物科技学院,河南,洛阳,471003 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014;四川大学”985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台、生命科学学院,成都,610064 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014
国内会议
长沙
中文
483-486
2006-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）