表达禽流感HA基因的重组马立克氏病病毒的构建
本文通过Apa Ⅰ和Not Ⅰ位点将HA基因亚克隆到表达LacZ基因的重组马立克氏病病毒的转移载体中,该转移载体的US片段内含有hCMV启动子和增强子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆,从而成功地构建了表达HA基因的马立克氏病病毒的转移载体.然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,用96孔板稀释法纯化表达LacZ基因和HA基因的重组MDVCV1988病毒株,获得蓝色的重组病毒.该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因.免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒能表达禽流感病毒HA蛋白.经6次纯化后,重组病毒的血凝效价达到1.64.
禽流感病毒 HA基因 马立克氏病病毒 转移载体 基因重组
李永清 杨敬 冯国民 周雪媚 陈小玲
北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089 军事医学科学院动物中心,100071
国内会议
长沙
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321-323
2006-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)