禽流感病毒(H5N1)NA基因的克隆及其真核表达载体的构建
本研究克隆了-株鸡源AIV H5N1亚型PQ分离株的NA基因,并对其进行了序列分析.结果表明NA基因开放阅读框架内含有1350个核苷酸,编码449个氨基酸.NA基因与HK156/97、GD1/96)和HKYU822.2/01的核苷酸和氨基酸同源性分别88.3%、97.4%、97.9%和91.5%、92.8%、98.5%.PQ分离株的NA茎部有20个氨基酸的缺失,从而使50、58、63、68位糖基化位点丢失,这.与HKYU822.2/01株完全一致.将NA基因定向亚克隆入杆状病毒Bac-to-Bac系统的转移载体pFastBacDual中,经酶切和PCR鉴定为阳性的重组转移载体再转化入含有杆粒和辅助质粒的DH10BacTM菌中,与杆粒DNA在细菌内进行同源重组.以M13为引物,用PCR方法鉴定重组杆粒DNA,结果证明成功构建了表达NA基因的重组杆状病毒表达载体.
禽流感病毒 NA基因 序列分析 基因克隆 真核表达载体
赵雪丽 刘新文 范根成 岳华 张志 李明义
西南民族大学,成都,610041;河南省兽医防治站,郑州,450002 青岛易邦公司,青岛,266032 西南民族大学,成都,610041 农业部动检所流研中心,青岛,266032
国内会议
长沙
中文
243-247
2006-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)