中国林蛙抗菌肽基因的克隆及在毕赤酵母中的表达
通过提取中国林蛙皮肤总RNA并进行RT-PCR获得抗菌肽基因,根据GenBank中已发表的蛙类的抗菌肽序列进行对比分析,表明所克隆基因为一新的抗菌肽基因-中国林蛙皮肤抗菌肽基因.将该基因克隆到酵母表达载体pPIC9K上,使其准确融合于a交配因子分泌信号之后,电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-.筛选出的转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,在28-30 ℃诱导后,经Tricine SDS-PAGE检测,表达产物可以在a信号因子的引导下分泌到培养基中.且分泌到培养基中的表达产物有抑菌活性.对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的PCR扩增,结果表明中国林蛙皮肤抗菌肽基因以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并有转录产物的存在.
林蛙皮肤 抗菌肽基因 酵母表达 抑菌活性
乔红伟 韩俊友 赵瑞利 王金玲 郑伟 雷连成 韩文瑜
吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 沈阳出入境检验检疫局,辽宁,沈阳,1100162 吉林省水产研究院,吉林,长春,130062
国内会议
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665-668
2006-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）