牛分枝杆菌Hsp65-ESAT6融合蛋白的表达及纯化

摘要：

以牛分支杆菌vallee株基因组DNA为模板,应用PCR法扩增hsp65和esat6两个基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建原核重组表达质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,以IPTG进行诱导(终浓度1mmol/L),进行SDS-PAGE电泳分析,结果表明:Hsp65-ESAT6融合蛋白是以包涵体形式表达,融合蛋白pET65-E6裂解为两部分,即58KD和30KD,两个蛋白分子量相加与预测的88KD相符,将表达的融合蛋白经Ni2+亲和层析的方法纯化.

关键词： 牛分之杆菌 纯化 PCR法 Hsp65基因片段 ESAT6基因片段 融合蛋白

作者: 迟磊 常月红 云孟克 赵福广 刘思国 宫强 王春来 赵昆 王勇 刘建东 刘慧芳 周媛媛

作者单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,动物细菌病研究室,哈尔滨,150001;吉林农业大学生物技术学院,长春,130118 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,动物细菌病研究室,哈尔滨,150001 吉林农业大学生物技术学院,长春,130118

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 515-518

在线出版日期: 2006-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）