大肠杆菌菌毛抗原K99与耐热肠毒素STⅠ融合基因的克隆与核苷酸序列测定

摘要：

采用PCR技术,从大肠杆菌K99中扩增出0.54 kb的K99菌毛抗原基因,然后将其克隆到pUCM-T载体上,并转化至受体菌DH5α中,采用碱性裂解法提取质粒DNA后,用BglⅡ鉴定K99插入的方向并测序.选择目的基因片段插入方向正确的质粒经BamH Ⅰ和SalⅠ双酶切后,通过T4连接酶与同样经BamH Ⅰ和SalⅠ双酶切合成的耐热肠毒素STⅠ核苷酸序列连接,再转化至受体菌DH5α中,通过PCR方法鉴定分析和核苷酸序列测序分析,证明插入的K99-STⅠ融合基因片段具有正确的核苷酸序列.

关键词： STⅠ基因 PCR技术 大肠杆菌 菌毛抗原K99 核苷酸 序列分析

作者: 李书光 沈志强 单虎 南松剑 管宇 刘吉山

作者单位: 莱阳农学院动物科技学院,山东,青岛,266109;山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东,滨州,256600 莱阳农学院动物科技学院,山东,青岛,266109

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 469-471

在线出版日期: 2006-11-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）