肠球菌属23S rRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用研究
根据GenBank中肠球菌23S rRNA特异性保守序列设计肠球菌属特异性引物与TaqMan探针,建立了检测肠球菌的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法.FQ-PCR反应体系的最佳Mg2+和探针工作浓度分别为5 mM/L和 0.2μM/L.以建立的FQ-PCR方法检测屎肠球菌呈阳性,检测两歧双歧杆菌、短小芽孢杆菌、保加利亚乳杆菌和大肠杆菌均呈阴性.灵敏性实验表明,该方法可检测到1.04个屎肠球菌的DNA样品.对同一鸭肠道粪便中提取的细菌总DNA进行5次检测出现良好的重复性,其Ct值分别为:34.1、34.5、34.4、34.5、34.2.对21、21、23、24、27、33、42、57日龄健康樱桃谷鸭的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠粪便1g及食管与气管全段内容物的检测结果表明均有肠球菌存在,其中盲肠肠球菌含量最多(5.895E+07-6.877E+09),食管的最少(1.672E+05-5.895E+07);且消化道与呼吸道肠球菌数量随着日龄的增加呈波状变化.该技术能够快速、准确、特异地对肠球菌进行定量分析.
肠球菌 23SrRNA 鸭 消化道 呼吸道
张素辉 程安春 汪铭书 杨晓燕 齐雪峰 黄永成 葛忠源 胡骑 陈孝跃
四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014
国内会议
中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛
广州
中文
390-397
2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）