鸭疫里默氏杆菌基因组文库的构建及免疫原性基因初步筛选

摘要：

提取血清1型鸭疫里默氏杆菌(RA)CH-1株基因组DNA,采用限制性内切酶Sau3A Ⅰ进行部分酶切消化,纯化回收1.0kb-6.5kb片段,将其用T4 DNA连接酶与经BamH Ⅰ酶切并去磷酸化的ZAP Express载体进行连接,用噬菌体包装蛋白包装.经测定包装滴度为5.23×106 pfu/ml,蓝白斑筛选重组率为96.8％,成功构建了血清1型RA CH-1株基因组文库.在此基础上以兔抗RA血清为抗体探针进行具有免疫原性蛋白的基因筛选,获得3个阳性克隆,经多次重复筛选后再进行体内删除,得到一含插入片段的质粒并测序,对所得的序列(GenBank登录号:DQ151838)进行生物信息学分析,结果显示该序列含有一长度为369个氨基酸的完整开放阅读框架,是一尚未见报道的RA基因序列,并且存在多个预测的抗原表位,是潜在的基因工程疫苗的候选基因.

关键词： 鸭疫里默氏杆菌 基因组文库构建 免疫原性基因 抗原表位

作者: 朱德康 程安春 汪铭书 丁轲

作者单位: 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,625014 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 576-582

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）