猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达

摘要：

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和VR-2332株的核苷酸序列,设计合成了一对特异性引物,对PRRSV四川分离株SCI和SC2进行RT-PCR,扩增出病毒ORF5基因.利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)成功构建了PRRSV四川分离株ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SCI-ORF5和pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5.通过脂质体转染法和电穿孔转染法将pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5转染Marc-145细胞,间接免疫荧光技术跟踪监测ORF5基因的表达情况表明,脂质体转染法和电穿孔转染法分别在转染26 h和23h后检测到ORF5基因特异性表达产物,随着培养时间的延长,特异性表达产物增多,两者均在56h达到高峰,证明pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5在Marc-145细胞中能高效表达,这为PRRSV基因疫苗在临床上应用提供了理论依据.

关键词： 猪繁殖 呼吸综合征病毒 ORF5基因疫苗 Marc-145细胞 猪 基因表达

作者: 希尼尼根 陈孝跃 程安春 汪铭书 陈希文 豆文波 李雪梅 刘伍梅 刘菲 张平英

作者单位: 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014;内蒙古农业大学动物科学与动物医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018 四川农业大学动物科技学院,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 616-621

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）