鸭病毒性肠炎病毒基因文库的构建及其核衣壳蛋白基因的发现、克隆与鉴定

摘要：

提取鸭病毒性肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)基因组DNA,超声波处理使其片段化,经补平末端后,分级分离并收集各部份DNA片段,与质粒pBluescript Ⅱ SK(+)连接,转化大肠杆菌DH5α,成功构建了DEV基因文库;随机选取文库中的重组质粒测序分析,DNA序列拼接后获得大于100bp以上ORF共187个,将其中一个含完整ORF的DNA片段,以BLASTX软件与Genbank上相应基因进行比对分析,初步确定为一种核衣壳蛋白基因;根据该基因片段序列,设计引物对DEVDNA进行PCR扩增,并克隆到pGEM-T载体上,转化宿主菌JM109,提取阳性重组质粒,经PCR检测、酶切鉴定、测序和生物信息学分析,确定该基因片段为DEV核衣壳蛋白基因.

关键词： 鸭病毒性肠炎病毒 基因文库 核衣壳蛋白基因 基因克隆

作者: 程安春 汪铭书 文明 周伟光 郭宇飞 贾仁勇 徐超 袁桂萍 刘一尘

作者单位: 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014;贵州大学生命科学院,贵阳,550025 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,雅安,625014;河南科技大学生命科学院,洛阳,47100

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛

会议地点: 广州

会议语种:中文

页码: 593-597

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）