大鼠TGF-β1 cRNA探针的实验合成
目的:利用分子生物学实验技术合成并标记大鼠TGF-β1 RNA探针.方法:从大鼠肺组织标本中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR),扩增出TGF-β1成熟肽编码区基因的cDNA片段,将其插入到pGEM-Teasy质粒中,并转化到大肠杆菌,挑选阳性克隆培养,提取重组质粒,并作核苷酸序列分析;用限制性内切酶单酶切后,再经地高辛标记检测试剂盒随机引物法标记,合成地高辛标记的TGF-β1 RNA探针.结果:通过实验方法构建了pGEM-T-rTGF-β1质粒,经酶切鉴定和测序,TGF-β1 RNA探针序列完全正确.结论:本研究以体外转录法合成了地高辛标记的大鼠TGF-β1 RNA探针,为进一步应用于大鼠肺纤维化的原位杂交研究提供了基础.
分子生物学 cRNA探针 原位杂交 肺组织
周华仕 彭佳萍 陈钧强 肖芸 朱丽瑾 张幸
浙江省医学科学院卫生学研究所 浙江大学肿瘤研究所分子病理室
国内会议
杭州
中文
352-356
2007-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）