可通过血脑屏障脑源性神经营养因子的制备及功能
目的:来源于人类免疫缺陷病毒(HIV)-Ⅰ型编码的反式激活蛋白(TAT)中的蛋白质转导域(PTD),能介导生物大分子通过血脑屏障.本文拟制备一种经血管途径给药后能通过血脑屏障(BBB)进入大脑的脑源性神经营养因子(BDNF)-TAT(PTD)融合蛋白.方法:克隆编码BDNF-TAT的cDNA,并经限制性内切酶酶切和核酸序列测定分析;构建其原核生物细胞表达载体,并在宿主细胞中进行诱导与表达,经亲和层析方法纯化融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,研究该融合蛋白促进神经细胞增生的生物活性,用免疫组化的方法研究经血管途径给予该融合蛋白后透过动物体内BBB的能力.结果:成功获得了编码BDNF-TAT融合蛋白的cDNA及其原核细胞表达载体;经纯化和鉴定得到了BDNF-TAT融合蛋白,分子量约为21kD;该融合蛋白能够促进神经细胞的增生;经尾静脉注射给药后4小时后,同对照组相比,样品组脑组织中皮层和海马等区域出现强阳性表达.结论:成功获得了BDNF-TAT融合蛋白,该融合蛋白具有生物学活性,并能够经血管途径给药后透过BBB进入大脑,具有治疗脑神经退行性疾病的应用前景.
脑源性神经营养因子 蛋白质转导域 血脑屏障 蛋白表达 蛋白纯化 免疫组织化学 神经退行性疾病
季爱民 马蕾蕾 苏丹 马翰章 李晓东 王秉钧 张忠义
南方医科大学珠江医院新药研发中心,广东,广州,510282
国内会议
广州
中文
2006-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）