三种不同方法纯化相思子毒素单抗的比较

摘要：

目的: 本实验分别采用不同的方法纯化相思子毒素单抗,以便寻求一种效果好、操作简便的纯化方法.方法: 采用硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵法和硫酸铵-蛋白A亲和层析法三种方法分离纯化相思子毒素单抗,并采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、BCA蛋白检测试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和双抗夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)对纯化产物进行了相对分子量、浓度、纯度、回收率及免疫活性的鉴定.结果: 纯化后单抗的回收率以硫酸铵沉淀法及辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵-蛋白A亲和层析法较低;产物纯度以硫酸铵-蛋白A亲和层析法和辛酸-硫酸铵法较高,硫酸铵沉淀法较差;不同方法纯化后的单抗活性未见降低;经分析比较,辛酸-硫酸铵法应是一种操作简单、成本低、纯化效果和回收效果较佳的提取方法.

关键词： 相思子毒素 单克隆抗体 纯化工艺 硫酸铵沉淀法

作者: 罗胜军 王哲 李小兵 魏东 马惠海 徐慧娟 姜涛 刘国文 谢光洪 高英杰

作者单位: 吉林大学畜牧兽医学院,吉林,长春,130062

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第6届会员代表大会暨学术研讨会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 276-280

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）