奶牛骨钙素基因的克隆与原核表达

摘要：

以奶牛骨组织提取的RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增出奶牛骨钙素全长cDNA,然后将扩增产物重组到PMD-18T载体中,测定了全基因的核苷酸序列.序列分析表明,奶牛骨钙素全长cDNA为303 bp,编码100个氨基酸,与GenBank中的X53699的序列完全相同.通过单链DNA连接延伸重叠PCR技术人工定点同义突变,将奶牛骨钙素成熟蛋白基因中的大肠杆菌稀有密码子同义突变成大肠杆菌常用密码子并亚克隆到PET-32a表达载体,转化到宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,成功表达出奶牛骨钙素融合蛋白.

关键词： 奶牛 骨钙素 基因克隆 基因突变 原核表达

作者: 祝海宝 郭定宗 李家奎 杨世锦 周东海 杨雪

作者单位: 华中农业大学动物医学院,武汉,430070

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第6届会员代表大会暨学术研讨会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 105-110

在线出版日期: 2006-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）