肉鸡HSP70基因克隆、原核表达及单克隆抗体制备

摘要：

利用RT-PCR方法扩增了肉鸡HSP70 mRNA,将其扩增产物克隆到PGEM-T Easy载体和原核表达载体pET-28a (+)上,进一步转化至大肠杆菌BL-21中,用IPTG诱导表达重组肉鸡HSP70.以纯化的重组肉鸡HSP70制备多克隆抗体,免疫印迹分析说明重组肉鸡HSP70具有很好的免疫原性.以纯化的重组肉鸡HSP70免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,获得2株分泌肉鸡HSP70单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步通过免疫印迹分析筛选出1株高特异性的肉鸡HSP70单克隆抗体,命名为BH70-1.免疫组织化学结果显示,单克隆抗体BH70-1具有很好的组织亲和力,是一种理想的抗体.

关键词： 热休克蛋白70 原核表达 单克隆抗体 肉鸡

作者: 孙培明 吴晓东 赵永刚 刘雨田 王志亮 鲍恩东

作者单位: 南京农业大学动物医学院,南京,210095;临沂大学农林学院,临沂,276005 农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心,青岛,266032 南京农业大学动物医学院,南京,210095

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

会议地点: 乌鲁木齐·石河子

会议语种:中文

页码: 100-108

在线出版日期: 2006-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）