鸡MHC Ⅰα-生物素化序列融合基因的构建、表达及纯化

摘要：

MHC-肽四聚体技术是近年来建立的检测特异性CTL的有效方法.为了构建鸡MHC-肽四聚体,本试验克隆了莱航鸡MHC Ⅰα(B-Fα)全基因,利用软件分析了其信号肽序列,构建了缺失信号肽且拼接了BirA底物肽序列(BSP)的融合蛋白重组表达载体pET-B-Fα-BSP,在大肠杆菌中得到表达,并优化了表达条件.SDS-PAGE分析表明所得融合目的蛋白约为40kD,Western-blot分析结果显示该重组蛋白成功融合了6×His标签.在此基础上建立了变性状态下纯化包涵体的方法,获得了高纯度的B-Fα-BSP融合蛋白,为在体外构建鸡MHC-肽四聚体,探讨禽类细胞免疫反应机制奠定了基础.

关键词： 鸡 MHC 基因克隆 生物素化序列 基因表达

作者: 刘光亮 童铁钢 王群 肖一红 孟庆文 吴东来

作者单位: 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001;中国农业科学院,研究生院,北京,100081 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,哈尔滨,150001

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十四次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十三次学术会议

会议地点: 乌鲁木齐·石河子

会议语种:中文

页码: 81-86

在线出版日期: 2006-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）