中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究

摘要：

本文运用RT-PCR技术对用ConA刺激的中国白兔外周血淋巴细胞(PMBCr)进行了扩增,将纯化后的PCR产物克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定.结果中国白兔IL-6基因全长726bp,编码242个氨基酸,其中前26个氨基酸残基构成信号肽序列.与不同物种IL-6基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列有一定的差异.在推导的中国白兔IL-6氨基酸序列中,在108-110位存在1个潜在的N-联糖基化位点,同时存在9个Cys残基.将pTIL-6双酶切,回收目的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-6,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组茵茵体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为29.5 kDa的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占茵体蛋白的16.2％.

关键词： 白介素6基因 分子克隆 基因表达 外周血淋巴细胞 中国白兔

作者: 孟庆玲 才学鹏 乔军 景志忠 张艳

作者单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046;甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃,兰州,730046

会议类型: 国内会议

会议名称: 全国兽医外科学第13次学术研讨会、小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 181-185

在线出版日期: 2006-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）