驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA的扩增及序列分析

摘要：

为了获得驯鹿β-防御素reBD-1全长cDNA序列,根据已获得的reBD-1 cDNA的已知序列设计一条序列特异性引物作为上游引物,反转录引物中的部分序列即3”接合器引物作为下游引物,克隆reBD-1 cDNA的3”末端序列.另外,采用反向嵌套PCR RACE法,根据reBD-1 cDNA的已知序列,设计一条5”末端磷酸化的特异性反转录引物和两对特异性反向嵌套PCR引物,首先进行反转录(RT),然后将mRNA反转录成的cDNA进行环化,最后进行反向嵌套巢式PCR,克隆reBD-1 cDNA的5”末端序列.结果成功的克隆出了reBD-1 cDNA的3”和5”末端序列,从而得到372 bp的reBD-1 cDNA全序列,其中包含44 bp 5”非翻译区(UTR)、192 bp的开放读码框(ORF)、终止密码子TAA、118 bp的3”UTR和poly(A)15° reBD-1 cDNA全序列的获得为进一步研究其基因结构、基因表达和基因功能奠定了基础.

关键词： 反向嵌套PCR β-防御素 驯鹿 cDNA 序列分析

作者: 杨银凤 郝永峰 都格尔斯仁

作者单位: 内蒙古农业大学,动物胚胎与发育生物学研究室,呼和浩特,010018

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会

会议地点: 武汉

会议语种:中文

页码: 163-169

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）