猪蛔虫感染期幼虫抑制消减cDNA文库的构建及分析
为了筛选与寄生线虫幼虫发育相关的基因,以猪蛔虫(Ascaris suum)为模型,分别提取感染期幼虫和其他各期幼虫及成虫的总RNA,纯化mRNA后,采用Clontech公司PCR-selectTM试剂盒进行反转录合成cDNA并进行抑制消减杂交(SSH),构建猪蛔虫感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库,并采用Southem斑点杂交进行消减效率的检测.结果表明,感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库具有较强的特异性.随机从文库中抽取45个克隆进行测序及在线BLAST分析,发现在得到的41个ESTs中,有40个ESTs与已报道的基因有较高的相似性,主要代表猪蛔虫第三期幼虫基因和成虫头部基因,有1个cDNA片段在GenBank上无明显相似性.猪蛔虫感染期幼虫差异表达的消减cDNA文库的成功构建,为进一步研究幼虫发育差异表达基因的功能奠定了基础.
猪蛔虫 感染期幼虫 差异表达基因
黄翠琴 陈宁 林瑞庆 宋慧群 朱兴全
华南农业大学兽医学院,广东广州,510640
国内会议
北京
中文
895-898
2006-10-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)