柔嫩艾美耳球虫Rhomboid相关基因在卡介苗中的表达
目的:构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒Rho-261和Rho-361,并将柔嫩艾美耳球虫Rhomboid蛋白基因在分枝杆菌中进行克隆和表达.方法:利用柔嫩艾美耳球虫单克隆抗体从本室所构建的cDNA表达文库中筛选出1个Rhomboid蛋白家族相关基因,PCR方法扩增该基因的完整开放阅读框.利用DNA重组技术将其克隆到大肠杆菌-分枝杆菌质粒穿梭载体pMV261和pMV361中,重组质粒电转化卡介苗中,经热诱导后,对基因表达产物进行SDS-PAGE电泳分析及Western blotting鉴定.结果:酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明成功构建了两个重组载体Rho-261和Rho-361,重组体经诱导表达了相对分子质量约为30KDa的蛋白,与预测分子质量相符.结论:在卡介苗中表达Rhomboid相关基因成功,为鸡球虫病重组苗的研究奠定了基础.
柔嫩艾美耳球虫 穿梭载体 卡介苗 单克隆抗体 鸡 球虫病
王秋悦 李建华 张西臣 宫鹏涛
吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062
国内会议
北京
中文
870-873
2006-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）