猪传染性胃肠炎病毒检测基因芯片的初步构建
本研究采用PCR方法扩增制备了一批靶基因并进行了纯化,对检测芯片的靶基因点样浓度、探针浓度、杂交温度、杂交时间进行了选择,对构建TGE检测芯片的靶基因进行了筛选和TGE探针的标记试验.结果表明质粒PCR扩增和采用异丙醇沉淀纯化的靶基因质量好,检测芯片的最佳靶基因点样浓度为200ng/μl,最佳探针浓度为3000pg/μl,预杂交时间为1h,杂交时间为3-6h,杂交温度为48℃,筛选出S”、S3、sM、M、N、ORF7、POL等7靶基因构建了TGEV检测芯片,采用多重PCR扩增标记了TGEV探针,Cy3-dCTP标记浓度为2.5μmol/L,构建的TGEV检测芯片与标记的混合探针杂交效果很好.TGE检测芯片的构建成功为进一步应用和评价该技术奠定了基础.
猪 胃肠炎病毒 基因芯片 靶基因
黄小波 曹三杰 文心田
四川农业大学动科院,动物传染病与基因芯片实验室,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安,625014
国内会议
北京
中文
829-833
2006-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）