用反向遗传技术致弱基因VIId型鹅源新城疫病毒ZJI株
将新城疫病毒ZJI株基因组cDNA全长分成7个片段,依次连接并克隆至TVT7R转录载体中,构建了含ZJI株全基因组cDNA的转录载体(pNDV/ZJI),pNDV/ZJI与三个辅助表达质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫病毒粒子.设计两对引物,经overlap PCR方法将该毒株F蛋白裂解位点的112、115和117位碱性氨基酸突变成弱毒株特征的非碱性氨基酸后,替换pNDV/ZJI上的对应序列,构建了转录载体pNDV/ZJIFM,将pNDV/ZJIFM与三个辅助表达质粒共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了致弱的基因VIId型鹅源新城疫病毒NDV/ZJIFM,获救病毒的鸡胚最小致死剂量平均死亡时间(MDT)大于120h,初步表明获救病毒的毒力已致弱,是一个较为理想的疫苗候选株.
新城疫病毒 反向遗传技术 致弱基因 鹅
胡顺林 张艳梅 孙庆 刘玉良 吴艳涛 刘秀梵
扬州大学,农业部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏扬州,225009
国内会议
北京
中文
665-669
2006-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）