猫白介素-18基因的分子克隆、序列分析及其表达研究
根据GenBank中报道的猫白介素-18基因(IL-18)序列,对用ConA刺激的实验猫外周血单核细胞(PBMCf)进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的PCR产物纯化后克隆入pMD18-T中得到重组质粒pTIL-18,进行核苷酸序列测定,并与不同物种的IL-18基因进行了序列比较.结果该基因全长579bp,编码192个氨基酸.在推导的猫IL-18氨基酸序列中,无信号肽序列和潜在的N-联糖基化位点,但存在4个Cys残基.与不同物种IL-18相比,猫IL-18与犬、羊、牛和猪IL-18核苷酸和推导的氨基酸序列有较高的同源性,与小鼠和鸡IL-18有明显的种属差异.将pTIL-18双酶切,回收目的基因片段亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为27.5 kDa的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的13.6％.
猫 白介素-18基因 基因表达 分子克隆 序列分析 大肠杆菌
乔军 夏咸柱 杨松涛 鞠会艳 黄耕
解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062;中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046 解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062 解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林,长春,130062;吉林大学农学部,吉林,长春,130118
国内会议
北京
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554-559
2006-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）