凉血活血复方对体外培养ECV304、HaCaT细胞的凋亡、增值及端粒酶活性的影响
目的:观察中药凉血活血复方水醇粗提液对人用生化表皮细胞(HaCaT)、人脐静脉内皮细胞(ECV304)的增殖抑制效应、细胞凋亡诱导作用以及其对细胞端粒酶活性的影响.为了进一步开发临床治疗银屑病的有效的方剂并以科学的检测手段判定中药药效和探索中药治疗银屑病的可能的机制. 方法:将不同浓度的凉血活血复方水醇粗提液分别地作用于体外培养的HaCaT、ECV304细胞,采用MTT法检测凉血活血复方水醇粗提液对细胞的增殖抑制作用以及药物的有效浓度范围及其IC50;采用倒置显微镜、投射电子显微镜观察细胞处理前后的形态学改变;流式细胞术检测细胞周期的变化及凋亡;应用端粒重复序列扩增-酶联吸附(TRAP-ELAISA)试剂盒检测两株细胞的端粒酶活性. 结果:(1)凉血活血复方可以抑制HaCaT、ECV304细胞的增殖,作用于HaCaT细胞24小时其IC50为155.83 mg/ml,相关系数为0.953;作用48小时IC50为71.57 mg/ml,相关系数为0.928;作用72小时IC50为41.27 mg/ml,相关系数为0.816.作用ECV304细胞24小时IC50为155.01 mg/ml,相关系数为0.987;作用48小时IC50为65.839 mg/ml,相关系数为0.917;作用72小时IC50为57.213 mg/ml,相关系数为0.884.且在一定浓度范围内呈明显的时间和浓度依赖性.(2)光镜下可见两株细胞呈现典型的凋亡细胞形态学特征.流式细胞仪检测发现药物以浓度依赖性的方式诱导两株细胞凋亡,细胞分裂周期阻滞于G2/M期.10 mg/ml、20 mg/ml、50 mg/ml凉血活血复方分别作用两株细胞48小时,凋亡比率分别为:1.4％、2.9％、4.0％和0％、2.8％、9.4％.(3)药物作用于两株细胞48小时,细胞端粒酶活性下降.
凉血活血复方 银屑病 细胞凋亡 端粒酶活性
刘晓明 李玉峰
大连医科大学附属一院
国内会议
上海
中文
172-188
2006-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）