富勒醇-FITC双发光分子标记麦胚凝集素亲和吸附固体基质室温磷光法测定痕量碱性磷酸酶
富勒醇(F)和异硫氰酸荧光素(FITC)在醋酸纤维素膜(ACM)上发射室温磷光(RTP),N,N-二甲基苯胺(DEA)同时对F、FITC的RTP有增敏作用,因而选用DEA-F-FITC双发光分子作为麦胚凝集素(WGA)的标记试剂.基于DEA-F-FITC双发光分子标记WGA的产物能与碱性磷酸酶(ALP)发生特异性的亲和吸附(AA)反应,其反应产物保持了F-FITC双发光分子RTP的优良特性,且△Ip值与ALP的含量呈现线性关系,据此建立了DEA-F-FITC双发光分子标记凝集素亲和吸附固体基质室温磷光法(AA-SS-RTP)测定痕量ALP的新方法.该方法的检出限为0.39fg spot-1(F),0.18fg spot-1(FITC)(直接法);0.15fg spot-1(F),0.097fg spot-1(FITC)(夹心法),灵敏度高.用本法和ELISA方法对比测定了血清试样中ALP的含量,结果相吻合.本研究表明,无论采用夹心法或直接法亲和吸附反应方式,均能体现出AA-SS-RTP将亲和吸附反应的专属性与固体基质室温磷光法的高灵敏度相结合的显著特征.同时表明,可分别采用F或FITC的磷光激发/发射波长进行测定,不仅提高了AA-SS-RTP的灵活性,而且适应性更广和灵敏度更高.同时讨论了直接法AA-SS-RTP测定ALP的反应机理.
富勒醇-FITC 标记 麦胚凝集素 亲和吸附固体基质室温磷光法 碱性磷酸酶
刘佳铭 洪碧琴 林萍萍 林清尾 曾丽清 高文燕 郑爱芳
漳州师范学院,化学系,漳州,363000
国内会议
南昌
中文
145-146
2006-10-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）