gsh1的克隆及在巴斯德毕赤氏酵母中的表达

摘要：

利用PCR技术克隆了来源于Saccharomyces cerevisiae ALJ036的γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synths)编码基因gsh 1,连接多拷贝表达载体pGAPZA,转化Pichia pastoris x-33,构建了重组菌Pichia pastoris x-33(pGAPZA-gsh 1);在高浓度Zeocin平板上筛选多拷贝阳性转化子,并采用PCR的方法进行验证.对阳性转化子的γ-glutamyl-cysteine synthas酶活力进行了测定,结果显示,重组酵母的γ-glutamyl-cysteine synthas的酶活力是宿主菌的2.99倍,在液体YEPD中重组菌GSH的产量为42.2 mg/L,是宿主菌的1.6倍.

关键词： gsh1 巴斯德毕赤氏酵母 酵母表达

作者: 艾丽静 饶志明 沈微 方慧英 诸葛健

作者单位: 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036;齐鲁制药有限公司,山东济南,250100 江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届全国发酵工程学术研讨会

会议地点: 江苏无锡

会议语种:中文

页码: 47-52

在线出版日期: 2006-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）