人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体(ScFv)的表达和鉴定
目的:对从噬菌体抗体库中筛选的人源抗狂犬病毒单链抗体A12进行可溶性表达及特异性鉴定和中和活性检测. 方法:将表达人源单链抗体的菌株A12进行诱导后进行SDS-PAGE及Westernblot检测,用流式细胞仪(FACS)检测其结合感染表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)测定A12表达产物的中和活性. 结果:westernblot显示经诱导的A12ScFv表达产物与抗C-myc抗体在约30KD处有强阳性表达带.FACS结果表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞有特异性反应.RFFIT结果表明,A12ScFv在1:27倍稀释时能完全中和病毒. 结论:A12经诱导后获得了可溶性表达,表达产物能特异性结合狂犬病毒G蛋白,并对狂犬病毒具有一定的中和活性.
单链抗体 狂犬病毒G蛋白 可溶性表达 噬菌体抗体库
闭兰 张爱华 孙可芳 胡巧玲 祝玉桃 王志友 余模松
武汉生物制品研究所,武汉,430060
国内会议
昆明
中文
59-62
2005-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）