Lentivirus介导表达多基因的人胚基因工程神经干细胞实验研究

摘要：

目的:探索以Lentivirus为载体,构建同时携带并表达多基因工程人胚神经干细胞(HumanNeuralstemcell,hNSC)的可行性,以便为脊髓损伤研究提供材料. 方法:①培养和鉴定hNSC②用携带绿色荧光蛋白(GreenFluorescenceProtein,GFP)和NT-3的lentivirus转染hNSC;③用荧光显微镜、鼠胚背根神经结培养(DorsalRootGanglion,DRG)和Soltbolt等方法检测基因工程hNSC的转基因表达. 结果:①获得了大量的基因工程hNSC;②荧光显微镜观察到几乎100﹪的基因工程hNSC表达GFP;③基因工程hNSC的培养液能促使DRG旺盛生长;④Slotblot检测到基因工程NSC能高效分泌NT-3蛋白. 结论:成功构建了同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC,为脊髓损伤基础研究及进一步临床应用提供有价值的细胞资源,具有广阔应用前景.

关键词： 人胚神经干细胞 基因工程 神经营养因子3 绿色荧光蛋白 脊髓损伤

作者: 蔡培强 汤逊 林月秋 M.0UDEGA B.BLITS 阳运康 徐林 周田华

作者单位: 成都军区昆明总医院骨科 The Miami Projectto Cure Paralysis，University of Miami School of Medicine，Miami，FL 33101，USA Graduate School for Neurosciences Amsterdam，Netherlands Institute for Brain Research，Amsterdam，The N 中国科学院昆明动物研究所

会议类型: 国内会议

会议名称: 云南省康复医学会四届一次学术大会

会议地点: 昆明

会议语种:中文

页码: 123-127

在线出版日期: 2005-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）