小干扰RNA抑制293T细胞中外源基因OX40的表达
目的:研究小分子干扰RNA(siRNA)抑制293T细胞中OX40基因表达的可行性.方法:根据大鼠OX40cDNA已知序列,设计并化学合成一条含19个核苷酸siRNA.将此siRNA包装入质粒载体后,转化质粒到大肠杆菌中,经克隆,扩增,纯化.应用Lipofectamine 2000将OX40基因表达载体与其相应siRNA(OX40-siRNA)质粒共转染293T细胞,观察siRNA载体对OX40基因的抑制效应.在转染后48h用实时定量PCR从基因转录水平检测OX40基因的表达率,并以western blot在蛋白水平检查293T细胞中OX40蛋白的表达水平.结果: siRNA转染293T细胞28h后,OX40靶mRNA及OX40蛋白的表达水平明显下降;且siRNA所介导的抑制效应与干扰载体剂量大小有关.结论:siRNA能抑制293T细胞中OX40基因表达,从而为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据.
小干扰RNA OX40 肿瘤坏死因子 基因表达 移植排斥反应
夏仁品 武聚山 卢实春 李宁 陈永兵 朱俊萍 丁惠国
首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科,北京,100069 首都医科大学微生物及免疫学系,北京,100069
国内会议
长沙
中文
174-181
2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）