HER2 siRNA抑制肺癌细胞增值的实验研究
目的:构建针对HER2的RNA干涉载体,观察对HER2表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响. 方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pcDNA3质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2的肺腺癌细胞系SPC-A-1,RT-PCR检测HER2的mRNA表达,WesternBlot和间接免疫荧光法检测HER2的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长. 结果:成功构建了HER2特异性RNA干涉载体pcDNA3-siHER2;瞬时转染SPC-A-1细胞,HER2的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢. 结论:成功构建了HER2RNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPC-A-1HER2的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢.实验结果可能为肺癌基因治疗提供一种新的选择.
肺癌 基因治疗 细胞增殖 免疫荧光法
任新玲 钱桂生 付海京 鲍炜 杨安钢
第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所,重庆,400037;第四军医大学西京医院呼吸内科 第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所,重庆,400037 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 第四军医大学基础部免疫学教研室
国内会议
亚太呼吸病学会慢性阻塞性肺疾病研讨会暨中国西部呼吸与危重医学学术会议
成都
中文
266-270
2006-08-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)