基于结核分枝杆菌16KD、38KD重组蛋白为抗原的血清学鉴定方法评价
目的：克隆表达结核分枝杆菌16KD和38KD重组蛋白,测定其抗原性和特异性. 方法：利用聚合酶链反应(PCR)自结核分枝杆菌基因组DNA扩增16KD和38KD抗原基因,经测序鉴定后克隆于pGEX4T-2表达载体,转化于大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其抗原性与特异性. 结果：携带重组质粒的菌株经诱导产生高水平的表达产物,纯化的表达产物具有较高的纯度、抗原性和特异性,16KD和38KD蛋白量分别为:688mg/L和217mg/L.其中16KD蛋白作为包被抗原ELISA法检测的灵敏度为67.0﹪,特异性为100﹪,准确性为84.0﹪;38KD蛋白作为包被抗原ELISA检测的灵敏度为79.8﹪,特异性为99﹪,准确性为:89.7﹪; 结论：以16KD、38KD重组蛋白为抗原具有良好的抗原性和特异性,可用于结核分枝杆菌诊断方法的建立及临床诊断.
结核分枝杆菌 重组蛋白抗原 基因表达 聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 血清学鉴定
苏明权 岳乔红 杨柳 周萍 段艳 杨军兰 刘家云 郝晓柯
第四军医大学西京医院检验科,陕西,西安,710032 西安交通大学第一医院 西安市结核病胸部肿瘤医院
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541-546
2005-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）