人乳腺珠蛋白mRNA FQ-PCR检测方法的建立及对乳腺癌微小转移的研究
目的：克隆人乳腺珠蛋白(humanmammaglobin,hMaM)基因,建立荧光定量PCR方法,探讨外周血hMaMmRNA的表达作为乳腺癌血行微小转移标志物的可能性. 方法：通过设计特异引物,用RT-PCR方法从乳腺癌组织扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18T载体;优化扩增条件,以pMD/M质粒制备标准曲线,建立FQ-PCR方法;以健康人组(n=18)为对照,用所建方法对不同分期的乳腺癌病人(n=28),乳腺良性疾病病人(n=15例),其它肿瘤病人(n=26例)的外周血进行检测. 结果：成功获得hMaM基因并完成克隆,阳性克隆测序结果与预期序列一致;建立了FQ-PCR检测hMaMmRNA方法;28例乳腺癌病人中9例阳性(Ⅰ期4例,Ⅱ期3例,Ⅲ期1例,Ⅳ期1例),阳性率为32.1﹪,hMaMmRNA的表达与乳腺癌病理分期无关(x2=0.5936;p＞0.05);乳腺癌病人组hMaMmRNA的表达与乳腺良性疾病组,其它肿瘤病人组及对照组比较差异显著(x2值分别为8.96,13.49和10.32,p值均＜0.005). 结论：hMaMmRNA是乳腺癌特异性标志物,其外周血的表达可作为乳腺癌血行微小转移的指标。
乳腺珠蛋白 荧光定量PCR 乳腺癌 血行微小转移 mRNA表达
吴国球 张臣 孙宏伟 赵成桂 芦惠霞
东南大学附属中大医院临床检验中心,中国,南京,210009
国内会议
长沙
中文
288-294
2005-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）