汉坦病毒Z10株N蛋白的表达及其在HFRS早期诊断中的应用
目的:汉坦病毒Z10株是从病人血清中分离到的,用于生产肾综合征出血热Ⅰ型和双价疫苗的病毒毒株,为了解该病毒N蛋白的抗原性及开发重组蛋白试剂用于HFRS病人的早期诊断. 方法:构建了Z10株N基因表达载体pET-28a-Z10S,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,经IPTG诱导表达后,产生约50KD的带6×His的融合蛋白,经ELISA检测,抗原滴度达1∶6400.N蛋白经离子交换柱与Ni离子亲和层析两步纯化后,通过研究抗原直接标记法,将N蛋白直接标记辣根过氧化酶,建立捕捉法检测早期抗肾综合征出血热抗体IgM. 结果:用该法与山东省淄博市生产的捕捉法IgM试剂盒对比,检测疑似出血热病人血清133份,结果两试剂的总符合率为97﹪,40份正常人血清均阴性. 结论:本室制备的捕捉法具有特异性更强、敏感,方便,适合于各级医院及基层门诊早期诊断肾综合征出血热之用,亦可用于流行病学调查.
汉坦病毒 N蛋白表达 IgM抗体 捕捉法ELISA 免疫诊断 肾综合征出血热
朱函坪 姚苹苹 徐芳 翁景清 谢荣辉 李婵 朱智勇
310009,杭州,浙江省疾病预防控制中心,肾综合征出血热重点研究实验室
国内会议
长沙
中文
159-163
2005-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)