聚合酶链反应法检测氨基糖苷类修饰酶基因(10种)

摘要：

目的:应用聚合酶链反应(PCR)技术检测氨基糖苷类修饰酶(aminoglycoside-modifyingenzymes,AMEs)基因.方法根据美国GenBank已登录AMEs基因序列,自行设计aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ、aac(6′)/aph(2″)Ⅱaph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4”)、ant(6)-Ⅰ等10种AMEs基因的PCR扩增引物和反应体系,并抽取各种靶基因阳性产物作产物直接DNA测序.结果:耐氨基苷类药物的革兰阴性铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴汤肠杆菌分别检出aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ等6种基因,高耐庆大霉素、链霉素粪球菌,高耐庆大霉素、链霉素屎肠球菌检出aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(6)-Ⅰ3种基因;耐庆大霉素、链霉素的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、ant(4′,4″)3种基因.测序显示与已在GenBank登录的相应序列相同.本文测得:31条AMEs基因序列已登录GenBank.结论:AMEs基因的PCR检测技术的建立为氨基糖苷类耐药机制研究,临床分离株监测和分子流行病学研究提供了手段.

关键词： 氨基糖苷类修饰酶 抗生素 聚合酶链反应

作者: 糜祖煌 陆亚华 黄支密 陶玉坚 秦玲 韦昌谦

作者单位: 无锡市克隆遗传技术研究所,江苏,无锡,214026 苏州大学医学院附属第三医院,江苏,常州,213003 解放军98医院,浙江,湖州,313000 扬州市第一人民医院,江苏,扬州,225000

会议类型: 国内会议

会议名称: 中华医学会首届全国内科感染及合理应用抗生素专题研讨会

会议地点: 呼和浩特

会议语种:中文

页码: 340-344

在线出版日期: 2005-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）