重组人肝再生增强因子的克隆、表达及纯化
本研究通过获得纯净的人肝再生增强因子(ALR)蛋白多肽,进行结构和功能的研究,以用于各种急慢性肝损伤及肝衰竭的治疗。方法:利用分子生物学方法,从人肝细胞提取总RNA,经一步法RT-PCR获得全长hALRCDNA,构建重组克隆PET28a(+)/ALR,原核诱导表达获得融合蛋白,以组氨酸为标签进行蛋白纯化,获得纯化的蛋白,用于质谱分析和进一步的动物实验及功能研究。结果:内切酶消化和DNA测序证实hALRCDNA全长序列正确插入表达载体PET28a(+),并在BL21(DE3)中成功表达约23KD的融合蛋白,用SDS-PAGE和Western-blot检验,结果与预期相符。结论:成功表达hALR融合蛋白,纯化和酶切后获ALR天然纯净蛋白,可直接用于进一步功能研究。
人肝再生增强因子 基因表达 蛋白纯化 蛋白多肽
盛吉芳 俞海英 李君 周林福
浙江大学医学院附属第一医院
国内会议
苏州
中文
380-384
2005-03-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)