猪干扰素γ基因克隆及转染表达效应研究
ConA刺激猪外周血淋巴细胞,用RT-PCR的方法克隆成华猪淋巴细胞干扰素-γ基因(IFN-γ),并在GenBank数据库中登记(登记号:AF493993).将克隆到的IFN-γ基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪淋巴细胞干扰素-γ基因的转录表达;通过猪和小鼠脾淋巴母细胞增殖实验检测猪淋巴细胞干扰素-γ基因真核表达产物的生物学活性.结果显示:转染细胞RNA中含有与IFN-γ基因对应的mRNA;淋巴母细胞增殖实验证明IFN-γ真核表达产物具有正常的生物学活性.为了探讨增强动物体液和细胞免疫免疫应答的方法,制备PLG纳米颗粒包装VPIFN-γ质粒系统地研究了VPIFN-γ对小鼠的细胞和体液免疫水平、对常规疫苗在不同的免疫佐剂协同作用下细胞免疫和体液免疫应答的变化情况实验结果表明:猪IFN-γ基因能显著提高动物的细胞和体液免疫水平,明显增强动物对常规疫苗的细胞免疫和体液免疫应答反应.我们还首次将阳离子脂质体包装的IFN-γ基因免疫猪,全面检测了猪的体液和细胞免疫水平,以及抵御外来强毒的免疫保护效应,结果发现:猪IFN-γ基因免疫猪后,猪的免疫球蛋白含量、IL-2诱生活性、特异性抗体滴度、淋巴细胞增殖反应和免疫细胞数均显著增加,能够显著增强免疫猪对常规疫苗的细胞和体液免疫应答反应水平;同时能够明显提高免疫动物的免疫保护反应,抵抗外来猪瘟强毒的感染.
猪 干扰素-γ 基因克隆 基因表达 疫苗 免疫增强
李江凌
四川省畜牧科学研究院,成都,610066
国内会议
哈尔滨
中文
326-330
2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）