梅山猪LH-β基因克隆及其表达效应研究
提取梅山猪脑垂体样品RNA,RT-PCR克隆获得梅山猪LH-β基因.将LH-βcDNA片段亚克隆到pGEX1-λT载体上,构建原核表达质粒pGPLH-β,以IPTG诱导融合蛋白表达,通过SDS-PAGE分析,在43KD处出现GST-PLH-β融合蛋白条带,证明猪LH-β基因得到了正确转录和表达.将LH-βcDNA片段克隆到真核表达型载体VR1020上,得到的重组质粒转染Cos7细胞株,结果显示已成功构建了PLH-β的真核表达质粒,能正确转录表达LH-β.首次制备阳离子脂质体包装VPLH-β质粒,与PMSG和hCG以及重组LH-β蛋白分别肌肉注射小鼠,系统地研究了它们对小鼠的生殖和免疫机能的影响.结果表明:本实验克隆构建的猪VPLH-β质粒、重组LH-β蛋白均能发挥明显的生殖生理调节作用,可较好地促进雌性动物的排卵、怀孕和正常产仔;并且对动物的免疫机能无不良影响,还表现出一定的免疫增强效应.本实验为进一步深入研究新型动物生殖生育调节基因制剂、开辟高效安全、经济简便的促进动物繁殖的新途径奠定了良好的基础.
猪LH-β 基因克隆 基因表达 生殖 免疫
吕学斌
四川省畜牧科学研究院,成都,610066
国内会议
哈尔滨
中文
342-346
2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）