基于BAC重组酶系统构建奶牛多位点基因打靶载体的研究

摘要：

以奶牛为研究对象,以其重复的rRNA基因间的间隔序列为靶位点,基于BAC重组酶系统构建多位点基因打靶载体,为建立体内多位点基因打靶技术获得关键材料.首先构建BAC-TDN筛选载体,然后构建pYLVS-GD表达载体.将BAC-TDN筛选载体和pYLVS-GD表达载体共转化至大肠杆菌NS3529中,通过Cre重组酶的作用形成BAC-TDN-VS-GD质粒,采用归位内切酶Ⅰ-SceⅠ切除pYLVS载体骨架,构建奶牛多位点基因打靶载体BAC-TDN-GD,利用接头LS使之环化.BAC-TDN-GD打靶载体与pYLSV质粒组成了通用型奶牛多位点打靶载体系统.目前的基因打靶技术存在打靶效率低、安全性差等问题,以重复序列为靶位点的多位点基因打靶技术将部分解决这些问题.

关键词： 基因打靶 多位点 载体 细菌人工染色体 重组酶系统 奶牛 重复序列

作者: 唐冬生 蒋泓 苏运贞 李月琴 张欣 李芳 周天鸿

作者单位: 广东佛山大学生命科学学院动物科学系,佛山,528000;广东暨南大学生命科学与技术学院,广州,510632 广东暨南大学生命科学与技术学院,广州,510632 广东佛山大学生命科学学院动物科学系,佛山,528000

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十三次全国动物遗传育种学术讨论会

会议地点: 哈尔滨

会议语种:中文

页码: 233-238

在线出版日期: 2005-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）