海洋Pseudoalteromonas sp.CY24中一种新琼胶酶的克隆和性质分析
从海洋Pseudoalteromonassp.CY24中克隆到一个新β-琼胶酶基因agaA,它的开放阅读框架为1359bp,编码的蛋白质理论分子量为48.4KD,等电点为535,蛋白质的N末端含有一段长度为23个氨基酸的信号肽.将agaA基因在大肠杆菌BL21(DE3)/pET24a系统中进行了重组表达,重组蛋白可分泌至发酵上清液,经镍离子柱纯化后达到了电泳纯.酶学性质研究发现其最适反应pH为6.5,最适反应温度为40℃.通过多序列比对发现AgaA中有两段保守区(EIDVLEVYG和VDWIRVYK),推测可能与催化功能有关.分别对第一段保守区的两个谷氨酸(E147和E152)进行定点突变,突变后酶活丧失,表明这两个位点对催化活性具有重要的作用.琼胶酶AgaA归属于糖水解酶的16家族,是一种内切酶,水解琼脂糖链的β-1,4糖苷键,生成新琼六糖和新琼四糖作为主要降解产物.
琼胶酶 新琼寡糖 糖水解酶 克隆
路新枝 韩峰 褚艳 于文功
中国海洋大学海洋药物与食品研究所,青岛,266003,中国
国内会议
厦门
中文
155-161
2005-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）