鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因原核表达及其免疫原性研究

摘要：

本文根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,对鸭源致病性大肠杆菌pilA基因进行PCR扩增,原核表达及免疫原性检测,获得如下结果:对扩增的pilA基因进行pMD18-T载体克隆,通过对pMD18-T-pilA及pET-32a(+)进行BamHI、HindⅢ双酶切,T4DNA连接酶连接,将pilA基因定向插入pET-32a(+),经BamHI和HindⅢ双酶切鉴定表明,成功构建重组表达质粒pET-32a-pilA,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物大小为36kD左右.表达产物用镍柱亲和层析对其进行纯化,获得较好的纯化效果.纯化后产物两次免疫雏鸭,两周ELISA抗体效价达1:1600,对同源菌株GH1.2的感染具有良好保护效果.

关键词： 鸭 大肠杆菌 Ⅰ型菌毛pilA 原核表达 纯化 免疫原性

作者: 于小娜 汪铭书 程安春 李玲 孙磊 段泽 钟传德 陈孝跃

作者单位: 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,6250143;双汇实业集团有限公司技术中心,河南,漯河,462000 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,6250143 四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

会议地点: 大庆

会议语种:中文

页码: 492-495

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）