灯盏花素抑制血管平滑肌细胞增殖的分子基础研究
目的研究反义凝血酶受体寡核苷酸(AntisenseThrombinReceptorOligo-deoxy-nucleotides,AntisenseTRODNs)及灯盏花素在凝血酶(Thrombin,Ⅱa)诱导的血管平滑肌细胞增殖中的作用,比较二者对血管平滑肌细胞凝血酶受体基因、蛋白表达功能及肌醇代谢的影响,以期在分子水平探讨高血压脑出血预防用药的作用机制以及药物筛选方法. 方法应用细胞转染、反转录聚合酶链式反应(ReverseTranscriptionPolymeraseChainReaction,RT-PCR)、免疫印迹(Western-Blot)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、氚-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)及3H肌醇掺入实验等对体外培养的第4-6代Sprague-Dawley(SD)大鼠血管平滑肌细胞的凝血酶受体基因、蛋白表达功能、核酸及肌醇代谢进行测定.探索灯盏花素和反义凝血酶受体对血管平滑肌细胞增殖的影响. 结果灯盏花素和反义凝血酶受体寡核苷酸均明显抑制凝血酶诱导的大鼠血管平滑肌细胞的增殖,与对照组、正义组相比,存在统计学差异(P＜0.05),RT-PCR、Western-Blot及ELISA试验结果显示灯盏花素和反义凝血酶受体显著抑制了大鼠血管平滑肌细胞凝血酶受体mRNA和蛋白的表达;且明显抑制了血管平滑肌细胞磷酸肌醇代谢.灯盏花素和反义凝血酶受体对平滑肌细胞增殖的抑制效应没有差异. 结论灯盏花素和凝血酶受体反义序列明显抑制血管平滑肌细胞增殖,其作用机制为通过抑制凝血酶受体基因的表达(mRNA和蛋白的表达),抑制细胞内信号传递来完成.灯盏花素在预防治疗高血压脑出血中的作用机制之一是通过阻断凝血酶受体表达抑制血管平滑肌细胞增殖而实现的,该研究结果为反义基因技术应用于心脑血管疾病药物作用位点的筛选提供了理论和实验依据.
高血压脑出血 灯盏花素 反义凝血酶受体寡核苷酸 凝血酶 凝血酶受体 血管平滑肌细胞 细胞增殖 蛋白表达 肌醇代谢
钱传云 郝萍 陈荣琳 王燕琼 王云徽 许汪斌 冯忠堂
昆明医学院第一附属医院急诊科、EICU,昆明,650032
国内会议
2006年急诊医学学术研讨会暨《中华急诊医学杂志》第五届组稿会
长春
中文
14-29
2006-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）