猪γ干扰素的逆转录病毒的构建及其在猪肾细胞(PK-15)中的表达

摘要：

本文将梅山猪γ干扰素基因定向插入逆转录病毒载体pLXSN(neor),构建逆转录病毒重组质粒,利用脂质体介导法将该重组质粒转染逆转录病毒包装细胞系PA317,转染细胞经含G418(400μg/mL)筛选一周后获得稳定产毒的PA317细胞系.从该细胞培养上清中提取RNA,进行RT-PCR检测,扩增到目的片断;将上清感染猪肾细胞(PK-15),经含G418(400μg/mL、600μg/mL和800μg/mL的DMEM筛选一周,收取PK-15细胞上清,在牛肾细胞(MDBK)上进行干扰素抗病毒活性检测,结果显示重组病毒表达的猪γ干扰素抗水疱性口炎病毒(VSV)的活性为1200IU/106cells·48h.试验结果表明猪γ干扰素基因已成功插入逆转录病毒基因组并在PK-15细胞中表达,表达的重组猪γ干扰素具有较强的抗病毒生物活性.

关键词： 猪γ干扰素 逆转录病毒 PA317细胞 PK-15细胞 抗病毒活性

作者: 姚清侠 刘新文 钱平 郭东春 陈焕春

作者单位: 华中农业大学预防兽医学院动物病毒室,武汉,430070

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

会议地点: 大庆

会议语种:中文

页码: 359-362

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）