多重PCR检测血清型1,2,6,7胸膜肺炎放线杆菌
本文根据胸膜肺炎放线杆菌APP外膜蛋白OmlA序列,血清型1,2,6,7英膜多糖CPS序列分别设计合成五对引物,优化PCR扩增条件,分别扩增出OmlA952bp,CPS1630bp,CPS2504bp,CPS6720bp,CPS7389bp特异性片段,建立了既可对APP进行定性检测又可对APP血清型1,2,6,7进行定型检测的多重PCR方法.对多重PCR特异性进行检测,结果从APP血清型1-4,6-10标准株中扩增出与引物相应的特异性片段;对常见的与猪呼吸道疾病有关的病原体猪副嗜血杆菌、猪肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、肠炎沙门氏菌、猪链球菌、大肠杆菌和猪丹毒杆菌进行扩增,均不能扩增出任何片段.把DNA模板倍比稀释进行敏感性试验,能够检测到10pg的DNA量.对从重庆四川两地送检和采集的45头疑似病猪分别进行扁桃体组织、肺组织检测及细菌分离鉴定,其中从12头猪的扁桃体和肺组织中扩增出了相应片段,同时也分离到了APP细菌,其中4/12为血清型1,8/12为血清型7.PCR鉴定结果与细菌分离鉴定结果完全一致.以上试验结果表明该方法适合于血清型1,2,6,7的鉴别诊断及流行病学调查.
胸膜肺炎放线杆菌 多重PCR CPS序列 扩增条件
陈华美 曹三杰 文心田 肖国生
四川农业大学动科院,动物传染病与基因芯片实验室,动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014
国内会议
中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会
大庆
中文
285-289
2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）