猪圆环病毒2型分子标记毒株的构建及生物学特性研究
本文以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆.通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入SalI制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株.采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明,在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原,其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致.鉴于新病毒基因组内插入一个SalI酶切位点,可用限制性片断长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别.新毒株经细胞连续传80代,体外培养增殖性能稳定,毒价可达107.OTCID50/ml.取第60代病毒培养物经肌肉和滴鼻途径接种35日龄抗体阴性仔猪4头,接种后表现出体温升高、进行性消瘦、被毛粗糙及体表淋巴结肿胀症状,迫杀后多种脏器中均能检测到病毒抗原与核酸.研究表明,利用感染性分子克隆手段构建带有遗传标记的PCV2新毒株,为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、分子诊断等研究奠定了基础.
猪圆环病毒2型 遗传标记病毒 生物学特性 病毒形态学
刘长明 危艳武 张超范 陆月华 孔宪刚
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
国内会议
中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会
大庆
中文
226-229
2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）