串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究

摘要：

本文利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确.PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA.重组腺病毒DNA经PacⅠ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白.将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应答(ELISA抗体和中和抗体)和细胞免疫应答(淋巴细胞增殖和CTL反应).证明该重组腺病毒具有较好的免疫原性,为下一步猪体免疫试验奠定了基础.

关键词： PRRSV M GP5 重组腺病毒 体液免疫 细胞免疫

作者: 蒋文明 姜平 李玉峰 汤景元 王先炜 杜以军

作者单位: 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

会议地点: 大庆

会议语种:中文

页码: 192-197

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）