中国林蛙抗菌肽基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

摘要：

本文通过提取中国林蛙皮肤总RNA并进行RT-PCR获得抗菌肽基因,根据GenBank中已发表的蛙类的抗菌肽序列进行对比分析,表明所克隆基因为一新的抗菌肽基因-中国林蛙皮肤抗菌肽基因.将该基因克隆到酵母表达载体pPIC9K上,使其准确融合于a交配因子分泌信号之后,电击转化毕赤酵母宿主菌GS115/His-.筛选出的转化子用甲醇作诱导剂进行小瓶发酵,在28-30℃诱导后,经TricineSDS-PAGE检测,表达产物可以在a信号因子的引导下分泌到培养基中.且分泌到培养基中的表达产物有抑菌活性.对酵母重组子用酵母染色体DNA的通用引物和目的片段的PCR扩增,结果表明中国林蛙皮肤抗菌肤基因以单拷贝整合到毕赤酵母染色体基因组中并有转录产物的存在.

关键词： 中国林蛙 皮肤抗菌肽基因 酵母表达 抑菌活性 毕赤酵母 RT-PCR

作者: 乔红伟 韩俊友 赵瑞丽 王金玲 郑伟 雷连成 韩文瑜

作者单位: 吉林大学畜牧兽医学院动物重要病原与疫病研究室,吉林,长春,130062

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

会议地点: 大庆

会议语种:中文

页码: 656-660

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）