牛干扰素-γ基因的RT-PCR扩增、序列分析及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

本文根据GenBank上发表的牛干扰素γ基因序列设计引物.从牛外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,采用RT-PCR技术,扩增出干扰素γ基因并进行了序列分析.琼脂糖凝胶电泳显示牛干扰素γ扩增片段约为500bp.序列分析结果表明,牛干扰素γ基因序列全长517bp,开放阅读框架内501个核苷酸,共编码166个氨基酸,分子量19.4kd,与参考序列完全一致.克隆序列经BamHI/EcoRI双酶切后连接到经同样双酶切的PBV220质粒中,转化入大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆进行温度诱导表达,经SDS-PAGE分析,在约19.4KD处有表达的蛋白带,表达产物经免疫荧光染色鉴定为阳性.

关键词： 牛 干扰素-γ RT-PCR方法 序列分析 克隆

作者: 李明峰 孙宏鑫 李凤华 段丽娟 任恩俊 庄国宏 江国托

作者单位: 大连轻工业学院生物与食品工程学院,大连,116034 大连三仪生物工程研究所,大连,116036

会议类型: 国内会议

会议名称: 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

会议地点: 大庆

会议语种:中文

页码: 586-589

在线出版日期: 2006-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）